Pinapadali ng Guanidine thiocyanate 593-84-0 ang pagkuha ng mga nucleotide at peptides mula sa viscera ng hayop

Guanidine thiocyanate | 593-84-0 | ay isang malakas na protina denaturant. Ito ay isang puting mala-kristal na pulbos, nanggagalit at sensitibo sa liwanag. Ito ay natutunaw sa ethanol at tubig, na may melting point na 118℃. Guanidine thiocyanate ay pangunahing ginagamit para sa denaturation, lysis ng mga cell at pagkuha ng RNA at DNA. Ito ay isang pangkaraniwang sangkap ng kemikal para sa pagkuha ng nucleic acid.

Ang patent cn111500664a ay nagsisiwalat ng isang pamamaraan para sa pagkuha ng mga nucleotide at polypeptides mula sa viscera ng hayop gamit ang guanidine thiocyanate. Ang mga nukleotide ay mga compound na binubuo ng base ng purine o base ng pyrimidine, ribose o deoxyribose at phosphoric acid, na malawakang ginagamit sa gamot, mga produkto ng ina at anak, pampalasa at mga additibo sa pagkain. Ang Polypeptide ay Î ± - Ang mga compound na nabuo ng mga amino acid na naka-link sa pamamagitan ng mga peptide bond ay mga intermediate na produkto ng protein hydrolysis, na kinasasangkutan ng iba't ibang larangan ng mga hormon ng tao, nerbiyos, paglago ng cell at pagpaparami. Ang kanilang kahalagahan ay nakasalalay sa pagsasaayos ng mga pagpapaandar ng pisyolohikal ng iba't ibang mga sistema at mga cell sa katawan, pinapagana ang mga kaugnay na mga enzyme sa katawan, na nagtataguyod ng pagkamatagusin ng intermediate metabolic membrane, o pagkontrol sa DNA transcription o nakakaapekto sa tukoy na synthesis ng protina, Sa paglaon ay gumagawa ng mga tiyak na physiological effects.

Ang mga laman ng hayop ay mayaman sa mga nucleotide at peptides, ngunit sa kasalukuyan, ang pagkuha ng mga nucleotides at peptides ay kadalasang isinasagawa nang hiwalay, na nagreresulta sa pag-aaksaya ng mga mapagkukunan at kumplikadong mga proseso. Guanidine thiocyanate ay kapaki-pakinabang upang kunin ang mga nucleotides at peptides mula sa viscera ng hayop. Ang mga tiyak na pamamaraan ay ang mga sumusunod:

Una, hugasan ang viscera ng mga sariwang hayop, alisan ng tubig ang mga ito, i-chop ang mga ito, pagkatapos ay i-mash ang mga ito, magdagdag ng deionized na tubig upang makuha ang pinaghalong solusyon, pagkatapos ay idagdag ang guanidine thiocyanate solution sa pinaghalong solusyon, mag-vibrate at ihalo nang mabuti, at pagkatapos ay tumayo. Pagkatapos, ang isang carrier na naglalaman ng silica ay idinagdag dito, dahil ang guanidine thiocyanate ay hahatiin ang mga selula, at ang mga nucleotide na inilabas mula sa mga selula ay isasama sa silica carrier. Ilabas ang carrier na naglalaman ng silica, i-absorb at ihiwalay ito ng eluent para makakuha ng purified nucleotides.

Pagkatapos, ang solusyon NaCl ay idinagdag sa natitirang solusyon kung saan ang silica carrier ay nakuha, ang halo-halong solusyon ay nakuha, pagkatapos ay idinagdag ang pinaghalong protease, pagkatapos ay isinasagawa ang microwave enzymatic hydrolysis, ang solusyon na enzymatic hydrolysis ay pinainit sa isang paliguan sa tubig , centrifuged, ang supernatant ay kinuha, at ang polypeptide ay nakuha pagkatapos ng freeze-drying.

Ang pamamaraang ito ay gumagamit ng mga katangian na ang guanidine thiocyanate ay maaaring sirain ang istraktura ng cell at denature ang protina. Hindi lamang ito makakapag-extract ng mga nucleotides at peptides nang sunud-sunod, ngunit mayroon ding mga pakinabang ng simpleng pamamaraan at mataas na kahusayan. Kasabay nito, iniiwasan din nito ang problema ng reaksyon sa pagitan ng mga biochemical reagents kapag nagdaragdag ng mga biochemical reagents para sa pagkuha.